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外源24-表油菜素内酯对茶树光合特性的影响 认领
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作者 万绮雯 杨妮 +4 位作者 李逸民 韩妙华 林士佳 滕瑞敏 庄静 《茶叶科学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期58-70,共13页
以中茶108为试验材料,研究喷施不同浓度(0.10、0.30、0.50 mg·L-1)24-表油菜素内酯(EBR)对茶树叶片叶绿素含量、气孔开度、光合气体交换参数及其相关基因表达的影响。结果表明,处理后第一天,叶面喷施0.10、0.30 mg·L-1 EBR显... 以中茶108为试验材料,研究喷施不同浓度(0.10、0.30、0.50 mg·L-1)24-表油菜素内酯(EBR)对茶树叶片叶绿素含量、气孔开度、光合气体交换参数及其相关基因表达的影响。结果表明,处理后第一天,叶面喷施0.10、0.30 mg·L-1 EBR显著增加了茶树叶片叶绿素含量,与对照相比,分别增加了38.89%、22.22%。处理后第三天和第五天,0.10、0.30 mg·L-1 EBR处理的茶树叶片气孔开度显著升高。处理后第一天和第五天,喷施EBR显著提高了茶树叶片的净光合速率。同时,EBR处理能显著上调BR合成酶基因、碳同化关键酶基因、叶绿素合成关键酶基因的表达。综上,外源EBR通过调控相关基因表达调节茶树叶片叶绿素含量、气孔开度,进而提高茶树叶片的光合作用能力。 展开更多
关键词 茶树 24-表油菜素内酯 叶绿素 光合特性 基因表达
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茶树CsDREB-A2转录因子基因的克隆与非生物胁迫响应分析 认领
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作者 韩妙华 滕瑞敏 +3 位作者 李辉 刘昊 林士佳 庄静 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期2647-2657,共11页
干旱应答元件结合蛋白(DREB)类转录因子在植物逆境信号转导途径中具有重要的调控作用。为了解AP2/ERF转录因子在茶树逆境胁迫的分子调控机理,本研究从茶树龙井43叶片的cDNA中克隆得到一个编码CsDREB-A2转录因子的基因;对CsDREB-A2基因... 干旱应答元件结合蛋白(DREB)类转录因子在植物逆境信号转导途径中具有重要的调控作用。为了解AP2/ERF转录因子在茶树逆境胁迫的分子调控机理,本研究从茶树龙井43叶片的cDNA中克隆得到一个编码CsDREB-A2转录因子的基因;对CsDREB-A2基因及其编码蛋白序列特征进行分析,并利用实时荧光定量PCR法检测该基因在茶树不同非生物胁迫处理下的表达水平。结果表明,CsDREB-A2基因开放阅读框为1056 bp,编码351个氨基酸,其编码氨基酸序列具有AP2保守结构域,包含典型的YRG元件和WLG基序。AP2结构域第14、第19位氨基酸分别为缬氨酸和谷氨酸。拟南芥AP2/ERF家族转录因子的进化分析表明,该转录因子属于DREB亚族的A2组。CsDREB-A2相对分子质量为39080 Da,理论等电点为5.32,属于亲水性蛋白,主要由α-螺旋和随机卷曲组成,无序化特征明显且存在一个LM无序区域;可能定位于细胞核,不存在信号肽和跨膜结构,属于非分泌蛋白。CsDREB-A2基因在高温(38℃)和干旱(200 g·L^-1 PEG)胁迫下均能快速诱导表达,并显著高于对照,分别在处理4、2 h达到最大值,为对照的20.70和42.90倍,植物在渗透胁迫下,可能通过ABA信号途径调节该基因对干旱的耐受性。高盐(200 mmol·L^-1 NaCl)胁迫下CsDREB-A2基因的表达受抑制,推测其可能存在负调控结构域降低该基因在盐胁迫下的表达量。本试验结果为研究DREB类转录因子在茶树抗逆胁迫的分子调控机制提供了一定的理论参考。 展开更多
关键词 茶树 CsDREB-A2 转录因子 非生物胁迫 表达分析
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茶树DHAR酶基因的克隆与非生物胁迫响应分析 认领 被引量:1
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作者 刘婧愉 滕瑞敏 +2 位作者 李辉 刘昊 庄静 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期983-994,共12页
利用RT-PCR技术从茶树‘龙井43’cDNA中克隆得到1个编码茶树脱氢抗坏血酸还原酶基因CsDHAR,该基因全长639 bp,编码212个氨基酸,属于谷胱甘肽转移酶(GST)超级家族成员,具较高保守性。系统进化分析结果表明CsDHAR蛋白与拟南芥DHAR1、DHAR... 利用RT-PCR技术从茶树‘龙井43’cDNA中克隆得到1个编码茶树脱氢抗坏血酸还原酶基因CsDHAR,该基因全长639 bp,编码212个氨基酸,属于谷胱甘肽转移酶(GST)超级家族成员,具较高保守性。系统进化分析结果表明CsDHAR蛋白与拟南芥DHAR1、DHAR2进化关系近,在不同物种间,与毛果杨、胡杨等植物亲缘关系较近;理化性质分析表明CsDHAR属于亲水性蛋白;结构分析表明CsDHAR蛋白具典型功能结构域,三级结构主要由α–螺旋和不规则卷曲构成。荧光定量PCR分析显示,CsDHAR在茶树叶片不同发育阶段表达量差异不显著;对‘龙井43’与‘安吉白茶’中CsDHAR进行荧光定量PCR分析,‘龙井43’在低温、高温处理4 h表达量最高、干旱和高盐处理24 h表达量最高;‘安吉白茶’在高温、高盐处理4 h表达量最高,干旱处理2 h表达量最高。不同逆境胁迫下CsDHAR均被诱导表达,表明该基因参与茶树响应逆境胁迫调节过程。 展开更多
关键词 茶树 脱氢抗坏血酸还原酶 序列特性 逆境响应 表达分析
茶树CsGME1基因的克隆与逆境胁迫响应分析 认领 被引量:1
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作者 杨雅焯 李辉 +3 位作者 林士佳 刘婧愉 滕瑞敏 庄静 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期232-239,共8页
该研究基于茶树转录组和基因组信息,以茶树‘龙井43’为实验材料,从其cDNA中克隆获得茶树CsGME1基因,并对其蛋白序列特征、基因表达模式及其在不同非生物胁迫下的表达水平进行实时荧光定量分析。结果显示:(1)茶树CsGME1开放阅读框长度为... 该研究基于茶树转录组和基因组信息,以茶树‘龙井43’为实验材料,从其cDNA中克隆获得茶树CsGME1基因,并对其蛋白序列特征、基因表达模式及其在不同非生物胁迫下的表达水平进行实时荧光定量分析。结果显示:(1)茶树CsGME1开放阅读框长度为1131 bp,编码376个氨基酸;该序列与多个相关物种的GME氨基酸序列一致性为94.25%,均含有NAD结合域。(2)进化树分析表明,茶树CsGME1基因与番茄SlGME1亲缘关系较近,与水稻OsGME2亲缘关系最远。(3)CsGME1蛋白属于亲水性蛋白,理论相对分子量为42046.84 Da,理论等电点为5.73,具有4个无序化区域,无序化程度较低;CsGME1蛋白二级结构由39.25%α-螺旋,13.26%延伸主链,5.84%β-转角和41.38%随机卷曲组成;三级结构分析结果显示,CsGME1包含螺旋和随机卷曲,与二级结构吻合。(4)荧光定量分析结果显示,在高温(38℃)、低温(4℃)、干旱(20%PEG)和高盐(200 mmol·L-1 NaCl)4种非生物胁迫处理下,茶树CsGME1基因均有响应,且表达存在差异,推测CsGME1参与了茶树的逆境胁迫响应过程。 展开更多
关键词 茶树 CsGME1 多序列比对 进化分析 非生物胁迫 表达分析
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广西六堡茶和重庆沱茶的微生物多样性分析 认领 被引量:1
5
作者 杨雅焯 汪迎 +1 位作者 李辉 庄静 《茶叶学报》 2019年第3期93-98,共6页
为了分析不同地区紧压茶中的真菌、细菌群落多样性分布,以广西六堡茶和重庆沱茶为材料,提取茶叶样品的总DNA,利用高通量测序技术进行ITS和16S rDNA测序和分析。结果表明,广西六堡茶和重庆沱茶中的微生物群落结构相差较大。重庆沱茶中的... 为了分析不同地区紧压茶中的真菌、细菌群落多样性分布,以广西六堡茶和重庆沱茶为材料,提取茶叶样品的总DNA,利用高通量测序技术进行ITS和16S rDNA测序和分析。结果表明,广西六堡茶和重庆沱茶中的微生物群落结构相差较大。重庆沱茶中的真菌物种丰富程度和均匀程度高于广西六堡茶,而广西六堡茶的细菌物种丰富程度和均匀程度要高于重庆沱茶。广西六堡茶真菌的优势菌为Blastobotrys;重庆沱茶真菌的优势菌为纤孔菌属(Bjerkandera)、青霉属(Penicillium)、德巴利酵母属(Debaryomyces)。广西六堡茶细菌的优势菌为鞘脂单胞菌属(Sphingomonas)、Saccharopolyspora、乳球菌属(Lactococcus)、乳杆菌属(Lactobacillus);重庆沱茶细菌没有明显的优势菌群。研究结果初步显示不同种类的紧压茶微生物群落不同,且多样性会存在差异。 展开更多
关键词 广西六堡茶 重庆沱茶 高通量测序 多样性 微生物
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茶树CsMDHAR基因的克隆与非生物胁迫响应分析 认领
6
作者 林士佳 李辉 +4 位作者 刘昊 滕瑞敏 刘婧愉 王爽 庄静 《茶叶科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期495-505,共11页
基于茶树转录组数据,以龙井43茶树cDNA为模板,克隆得到开放阅读框(ORF)长度为1 305 bp,编码434个氨基酸的茶树单脱氢抗坏血酸还原酶基因,命名为CsMDHAR。蛋白序列特征和基因表达模式分析表明,CsMDHAR蛋白含有FAD结合功能域,属于FAD依赖... 基于茶树转录组数据,以龙井43茶树cDNA为模板,克隆得到开放阅读框(ORF)长度为1 305 bp,编码434个氨基酸的茶树单脱氢抗坏血酸还原酶基因,命名为CsMDHAR。蛋白序列特征和基因表达模式分析表明,CsMDHAR蛋白含有FAD结合功能域,属于FAD依赖的吡啶核苷酸-硫基氧化还原酶(Pyr-redox-2)家族。该蛋白有两个无序化区域,而且包含有32个磷酸化位点,理论相对分子量为47.21 kDa,pI为5.99,属于亲水性蛋白;CsMDHAR蛋白二级结构以α-螺旋和随机卷曲为主。通过PlantCARE和PLACE对启动子上游调控元件进行分析预测,结果显示,CsMDHAR基因启动子上游1 000 bp中含有多个与光、激素以及植物抗逆有关的顺式作用元件。利用荧光定量PCR方法检测龙井43和迎霜的CsMDHAR、CsAO和CsAPX在4种不同非生物胁迫下的表达水平,结果表明,在低温(4℃)胁迫下,两个茶树品种的CsMDHAR、CsAO和CsAPX的表达均受抑制,且品种间的差异较小;在高温(38℃)和干旱(200 g·L^-1 PEG)胁迫下龙井43中的CsMDHAR表达均上调,分别在8 h和2 h时达到最大值,为对照的1.49倍和1.85倍;盐(200 mmol·L^-1 NaCl)胁迫下,CsAO和CsAPX在两种茶树品种中的表达量变化趋势相似,但变化幅度不同,可能与品种间不同的抗逆性有关。 展开更多
关键词 茶树 CsMDHAR 抗坏血酸 非生物胁迫 启动子元件分析 表达分析
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茶树蛋白激酶基因CsCIPK的克隆与表达特性分析 认领 被引量:4
7
作者 刘昊 王文丽 +4 位作者 滕瑞敏 李辉 王瑜 王永鑫 庄静 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期96-106,共11页
以茶树品种‘龙井43’作为材料,利用RT-PCR方法,从茶树的cDNA中克隆得到1个编码蛋白激酶的基因,命名为CsCIPK。序列分析表明,CsCIPK开放阅读框长度为1 341 bp,编码446个氨基酸,蛋白质分子量为414234。蛋白功能域预测和多重对比显示,CsC... 以茶树品种‘龙井43’作为材料,利用RT-PCR方法,从茶树的cDNA中克隆得到1个编码蛋白激酶的基因,命名为CsCIPK。序列分析表明,CsCIPK开放阅读框长度为1 341 bp,编码446个氨基酸,蛋白质分子量为414234。蛋白功能域预测和多重对比显示,CsCIPK蛋白含有1个保守的N端激酶结构域和1个相对不保守的C端调节结构域,即丝氨酸/苏氨酸激酶结构域和NAF结构域。理化性质、亲/疏水性、无序化分析显示,CsCIPK属于疏水性蛋白,理论等电点为7.04,有4段无序化区域,其二级结构分析显示主要由α螺旋、不规则卷曲组成。通过实时荧光定量PCR对‘龙井43’和‘安吉白茶’中的CsCIPK表达特性进行分析。结果显示‘龙井43’中CsCIPK的相对表达量在高温、干旱及盐处理4 h、低温处理24 h时达到最高。‘安吉白茶’中CsCIPK的相对表达量在高温及盐处理4 h、低温及干旱处理1h时达到最高。CsCIPK在‘龙井43’的根中,‘安吉白茶’茎中表达量最高。不同浓度的GA和IBA处理‘龙井43’茶苗,结果显示0.2 mmol·L-1 GA处理后,CsCIPK表达量先升高后下降,6 d时处理组为对照组的62倍;0.6 mmol·L-1 IBA处理后,CsCIPK的表达量在3 d时显著高于对照组;不同浓度GA和IBA处理后,9 d时CsCIPK表达量均显著低于对照。 展开更多
关键词 茶树 蛋白激酶 CsCIPK 组织表达 非生物胁迫 激素处理
茶树CsCIGR基因克隆及表达特性分析 认领 被引量:3
8
作者 王爽 王永鑫 +3 位作者 王瑜 李辉 滕瑞敏 庄静 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期867-875,共9页
该研究以茶树基因组数据库为基础,采用RT-PCR技术,从茶树‘龙井43’中克隆得到基因CsCIGR。序列分析显示,CsCIGR基因开放阅读框长度为1677bp,编码588个氨基酸。进化分析表明,CsCIGR属于GRAS家族的PAT1亚家族。多序列比对显示,茶树CsCIG... 该研究以茶树基因组数据库为基础,采用RT-PCR技术,从茶树‘龙井43’中克隆得到基因CsCIGR。序列分析显示,CsCIGR基因开放阅读框长度为1677bp,编码588个氨基酸。进化分析表明,CsCIGR属于GRAS家族的PAT1亚家族。多序列比对显示,茶树CsCIGR蛋白与其他植物的GRAS蛋白氨基酸序列具有很高的相似性。氨基酸理化性质分析显示,CsCIGR转录因子属于亲水性蛋白。亚细胞定位预测显示,CsCIGR可能位于细胞核中。启动子预测分析发现,CsCIGR启动子区域包含胁迫响应元件(STRE)、干旱应答元件(MYC)、厌氧诱导元件(ARE)等多种与逆境响应相关的顺式作用元件。荧光定量PCR分析结果显示,CsCIGR基因在低温(4℃)、高温(38℃)、干旱(200g·L^-1PEG)、高盐(200mmol·L^-1NaCl)胁迫下均能诱导表达,且对高盐,低温和高温胁迫响应更为明显,推测CsCIGR基因在茶树响应逆境胁迫中发挥重要作用。该研究为茶树抗性育种筛选基因提供了重要理论依据。 展开更多
关键词 茶树 CsCIGR 进化分析 非生物胁迫 表达分析
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茶树CsGIF1基因的克隆及其对非生物胁迫的响应分析 认领 被引量:1
9
作者 王雅慧 王永鑫 +2 位作者 王文丽 吴致君 庄静 《西北植物学报》 CSCD 北大核心 2017年第12期2363-2369,共7页
GRFINTERACTING FACTOR(GIF)基因是植物叶发育相关的一类重要调控因子,调节植物叶器官的发育。该研究采用RTPCR方法从茶树‘龙井43’的叶片cDNA中克隆得到CsGIF1基因,并利用荧光定量PCR分析了高温(38℃)、低温(4℃)、干旱(200g·L-1... GRFINTERACTING FACTOR(GIF)基因是植物叶发育相关的一类重要调控因子,调节植物叶器官的发育。该研究采用RTPCR方法从茶树‘龙井43’的叶片cDNA中克隆得到CsGIF1基因,并利用荧光定量PCR分析了高温(38℃)、低温(4℃)、干旱(200g·L-1PEG)、盐胁迫(200mmol·L-1NaCl)下CsGIF1基因的表达水平,以明确CsGIF1基因对非生物胁迫的应答特性,为茶树CsGIF1基因的逆境调控以及功能研究奠定基础。结果表明:(1)CsGIF1基因长666bp,编码221个氨基酸,具有高度保守的SNH结构域;CsGIF1蛋白为亲水性蛋白,理论相对分子质量为23380,理论等电点为6.30;酸性氨基酸、碱性氨基酸、芳香族氨基酸和脂肪族氨基酸所占比例分别为7%、9%、5%和13%;蛋白质二级结构显示,茶树CsGIF1蛋白由38.01%的α螺旋、10.41%的β折叠、12.22%的延伸主链和39.37%的随机卷曲组成。(2)qRTPCR分析显示,茶树CsGIF1基因对于4种非生物胁迫均有响应,但不同处理响应不同。其中在胁迫2h时,高温和低温胁迫下,CsGIF1基因相对表达量显著增加,分别为对照的3.54和5.69倍,且高低温胁迫下,CsGIF1基因响应明显大于干旱和盐胁迫。在高温、低温、干旱、盐等不同胁迫处理下,茶树‘龙井43’中CsGIF1基因的表达水平与对照相比均差异明显。 展开更多
关键词 茶树 CsGIF1 基因克隆 多序列比对 非生物胁迫 表达分析
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茶树发育相关基因CsARGOS的克隆与表达特性分析 认领 被引量:1
10
作者 王文丽 吴致君 +2 位作者 刘志薇 崔新 庄静 《植物生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期38-44,共7页
植物发育相关基因ARGOS基因受生长素诱导,在植物的生长发育和激素调控方面起着重要的作用。本实验选取茶树品种‘龙井43’作为试验材料,利用RT-PCR方法,从茶树c DNA中克隆得到茶树ARGOS基因,命名为Cs ARGOS。序列分析表明,Cs ARGOS基因... 植物发育相关基因ARGOS基因受生长素诱导,在植物的生长发育和激素调控方面起着重要的作用。本实验选取茶树品种‘龙井43’作为试验材料,利用RT-PCR方法,从茶树c DNA中克隆得到茶树ARGOS基因,命名为Cs ARGOS。序列分析表明,Cs ARGOS基因开放阅读框为366 bp,编码121个氨基酸。进化树分析显示,Cs ARGOS蛋白与双子叶植物的进化树关系相对较近,与单子叶植物的进化树关系相对较远。序列多重比对显示,Cs ARGOS蛋白具有ARGOS蛋白的特征基序,C端均含有丰富的亮氨酸,N端亲水性氨基酸居多,这些区域在物种中是相对保守的。氨基酸组分、理化性质、亲水性/疏水性、二级结构预测和无序化分析显示,茶树Cs ARGOS是疏水性蛋白,以随机卷曲为主,无序化特征不明显。利用实时荧光定量PCR对Cs ARGOS基因在茶树中的表达进行检测,分析结果表明在不同组织中,Cs ARGOS基因的表达水平从高到低依次为根〉第三叶〉第四叶〉老叶〉嫩茎〉第二叶〉第一叶;不同激素处理下,Cs ARGOS的表达水平从高到低依次为GA3〉SA〉ABA〉Me JA〉IAA。 展开更多
关键词 茶树 ARGOS 进化树分析 不同组织 激素处理
茶树MADS-box转录因子基因的克隆与非生物胁迫响应分析 认领 被引量:2
11
作者 沈威 滕瑞敏 +4 位作者 李辉 刘志薇 王永鑫 王文丽 庄静 《茶叶科学》 CSCD 北大核心 2017年第6期575-585,共11页
本研究基于茶树转录组数据库,以茶树龙井43为试验材料,通过RT-PCR方法从该茶树的cDNA中克隆得到1个CsMADS1基因。序列分析表明:茶树CsMADS1基因开放阅读框长度为657 bp,编码218个氨基酸,是典型的植物MADS-box家族转录因子。序列多重比... 本研究基于茶树转录组数据库,以茶树龙井43为试验材料,通过RT-PCR方法从该茶树的cDNA中克隆得到1个CsMADS1基因。序列分析表明:茶树CsMADS1基因开放阅读框长度为657 bp,编码218个氨基酸,是典型的植物MADS-box家族转录因子。序列多重比对显示,该序列与多个相关物种的MADS-box序列一致性为65.65%,含有高度保守的MADS结构域和半保守的K结构域。氨基酸理化性质、亲疏水性、亚细胞定位预测、无序化分析,以及二级和三级结构分析显示,CsMADS1转录因子是亲水性蛋白,可能定位于细胞核中,无序化程度明显,以α-螺旋结构为主,并与人MEF2蛋白具有相似的三级结构。利用实时荧光定量PCR方法分析了茶树龙井43中CsMADS1基因在非生物胁迫下的表达。结果表明,茶树中CsMADS1基因对高温、低温、干旱和高盐等不同非生物胁迫有响应,且表达存在差异。 展开更多
关键词 茶树 MADS-BOX 转录因子 进化分析 非生物胁迫 表达分析
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茶树类黄酮3′-羟化酶基因的克隆与表达特性分析 认领 被引量:5
12
作者 王文丽 吴致君 +4 位作者 刘志薇 王永鑫 李辉 崔新 庄静 《茶叶科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期108-118,共11页
类黄酮3′-羟化酶(Flavonoid 3′-hydroxylase,F3′H)是细胞色素P450酶家族(Cytochrome P450,CYP450)的单加氧酶,在植物次生代谢和逆境调控方面起着重要的作用。本实验以茶树品种龙井43作为试验材料,利用RT-PCR方法,从cDNA中克隆得... 类黄酮3′-羟化酶(Flavonoid 3′-hydroxylase,F3′H)是细胞色素P450酶家族(Cytochrome P450,CYP450)的单加氧酶,在植物次生代谢和逆境调控方面起着重要的作用。本实验以茶树品种龙井43作为试验材料,利用RT-PCR方法,从cDNA中克隆得到茶树中编码类黄酮3′-羟化酶基因,命名为CsF3′H1。序列分析显示,CsF3′H1基因开放阅读框为1 530 bp,编码509个氨基酸,含有相对保守的P450酶系结合域。进化树分析表明,CsF3′H1与CsF3′H3的进化树关系相近,与CsF3′H2的进化树关系较远。序列多重比对显示,CsF3′H1蛋白具有F3′H蛋白的特征基序,并与高粱、猕猴桃、杨树、拟南芥和葡萄同源蛋白一致性为66.48%。氨基酸组分、理化性质、亲水性/疏水性和无序化分析显示,CsF3′H1是亲水性蛋白,无序化特征不明显。利用实时荧光定量PCR对CsF3′H1基因在茶树不同组织和不同激素处理下的表达谱进行检测,结果显示:不同组织中,CsF3′H1基因的表达水平在第一叶中最高,之后随着叶片的成熟逐渐下降,CsF3′H1基因在老叶和根中几乎不表达,表达水平从高到低依次为第一叶〉第二叶〉第三叶〉第四叶〉嫩茎〉根〉老叶;在不同激素处理中,CsF3′H1在SA激素处理下的表达量最高,为对照的2.24倍,在MeJA处理下表达量最低,为对照的0.43倍。 展开更多
关键词 茶树 类黄酮3′-羟化酶 进化树分析 组织表达 激素处理
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茶树品种‘安吉白茶’CsDREB-A4b基因的克隆及其对非生物胁迫的响应 认领 被引量:3
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作者 李彤 严雅君 +3 位作者 韩洪润 刘志薇 吴致君 庄静 《植物资源与环境学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期1-9,共9页
采用RT-PCR方法从茶树﹝Camellia sinensis ( Linn.) O. Ktze.﹞品种‘安吉白茶’(‘Anjibaicha’)叶片的cDNA中克隆得到1个编码DREB转录因子的基因,命名为CsDREB-A4b。序列分析结果显示,CsDREB-A4b基因包含长度为873 bp的开放阅读... 采用RT-PCR方法从茶树﹝Camellia sinensis ( Linn.) O. Ktze.﹞品种‘安吉白茶’(‘Anjibaicha’)叶片的cDNA中克隆得到1个编码DREB转录因子的基因,命名为CsDREB-A4b。序列分析结果显示,CsDREB-A4b基因包含长度为873 bp的开放阅读框,编码290个氨基酸,具有保守的AP2结构域。与拟南芥﹝Arabidopsis thaliana ( Linn.) Heynh.﹞AP2/ERF家族转录因子进行同源进化分析,CsDREB-A4b转录因子属于DREB亚族中的A4组。多重比对结果显示:CsDREB-A4b转录因子与蓖麻(Ricinus communis Linn.)等植物的DREB类转录因子保守结构域氨基酸序列的相似性较高。 CsDREB-A4b转录因子为亲水性蛋白,理论相对分子质量为31938.5,理论等电点为pI 5.91,总平均疏水性为-0.603,碱性、酸性、芳香族和脂肪族氨基酸的比例分别为12%、12%、7%和15%。在高温(38℃)胁迫处理前期,CsDREB-A4b基因的相对表达量显著高于胁迫处理前;在低温(4℃)胁迫处理下,CsDREB-A4b基因的相对表达量呈显著升高的趋势;在盐(200 mmol·L-1 NaCl)和干旱(200 g·L-1 PEG)胁迫处理下,CsDREB-A4b基因的相对表达量呈先降低后显著升高的趋势。表明CsDREB-A4b基因参与‘安吉白茶’非生物胁迫的响应过程,且在不同胁迫条件下具有表达差异性。 展开更多
关键词 茶树 '安吉白茶’ DREB转录因子 CsDREB-A4b基因 非生物胁迫 表达分析
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低温条件下ABA和钨酸钠对茶树叶片中渗透调节物质含量及抗氧化酶活性的影响 认领 被引量:3
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作者 李磊 周琳 +3 位作者 李庆会 徐辉 朱旭君 房婉萍 《植物资源与环境学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期18-24,共7页
为探讨外源脱落酸(ABA)及其抑制剂钨酸钠对茶树也Camelliasinensis(Linn.)O.Ktze.页耐寒性的影响效应,以茶树品种‘龙井43爷(‘Longjing43爷)的2年生幼苗为实验材料,在低温(4益)条件下分别设置50mg·L-1ABA和20mmol·L-1钨酸钠... 为探讨外源脱落酸(ABA)及其抑制剂钨酸钠对茶树也Camelliasinensis(Linn.)O.Ktze.页耐寒性的影响效应,以茶树品种‘龙井43爷(‘Longjing43爷)的2年生幼苗为实验材料,在低温(4益)条件下分别设置50mg·L-1ABA和20mmol·L-1钨酸钠单一及复合处理共6个处理组(T1:仅喷施蒸馏水,对照;T2:仅喷施ABA;T3:仅喷施钨酸钠;T4:同时喷施ABA和钨酸钠;T5:0h时喷施ABA,24h时喷施钨酸钠;T6:0h时喷施钨酸钠,24h时喷施ABA),对处理0~72h叶片中渗透调节物质含量和抗氧化酶活性的变化进行了比较分析。结果显示:低温条件下,各处理组幼苗叶片中可溶性糖、游离脯氨酸和可溶性蛋白质含量以及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和过氧化物酶(POD)活性均在处理初期逐渐升高,之后各指标的变化趋势存在差异。在处理的中后期,除T4处理组的游离脯氨酸含量低于对照组外,各处理组的可溶性糖、游离脯氨酸和可溶性蛋白质含量总体上显著高于对照组;T2处理组的SOD、CAT和POD活性均显著高于对照组,而T3处理组仅SOD活性明显高于对照组,其CAT和POD活性则低于或略高于对照组。对各单一与复合处理组的比较结果显示:T4处理组的SOD和POD活性总体上低于T2处理组,但高于T3处理组;而其CAT活性总体上低于T2和T3处理组。在处理24h后,T5处理组的可溶性糖、游离脯氨酸和可溶性蛋白质含量以及SOD和POD活性的变化趋势与T2处理组一致;T6处理组的可溶性糖和游离脯氨酸含量及POD活性变化趋势与T3处理组一致,而其可溶性蛋白质含量以及SOD和CAT活性的变化趋势却与T3处理组有一定差异。上述研究结果表明:低温条件下喷施适量的ABA或钨酸钠均可以提升茶树叶片中渗透调节物质含量及抗氧化酶活性,但同时喷施ABA和钨酸钠对茶树叶片中渗透调节物质含量及抗氧化酶活性的影响却不显著。 展开更多
关键词 茶树 脱落酸(ABA) 钨酸钠 耐寒性 渗透调节物质 抗氧化酶
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茶树中2个NAC转录因子基因的克隆及温度胁迫的响应 认领 被引量:7
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作者 王永鑫 刘志薇 +3 位作者 吴致君 李辉 黎星辉 庄静 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期2148-2156,共9页
利用茶树转录组数据库,检索得到2个NAC家族转录因子基因CsNAC1和CsNAC2。通过RT-PCR方法,将其从茶树‘迎霜’中分离克隆,利用荧光定量PCR方法,对CsNAC1和CsNAC2基因在‘迎霜’和‘安吉白茶’2个茶树品种不同组织以及温度胁迫处理下的表... 利用茶树转录组数据库,检索得到2个NAC家族转录因子基因CsNAC1和CsNAC2。通过RT-PCR方法,将其从茶树‘迎霜’中分离克隆,利用荧光定量PCR方法,对CsNAC1和CsNAC2基因在‘迎霜’和‘安吉白茶’2个茶树品种不同组织以及温度胁迫处理下的表达进行分析,以探讨NAC家族转录因子在温度胁迫下的响应特征。结果表明:(1)CsNAC1和CsNAC2基因开放阅读框长度分别为1 044和1 047bp,分别编码347个和348个氨基酸;蛋白功能域预测和多重对比显示,CsNAC1和CsNAC2蛋白N端均含有典型NAC家族成员所具有的NAM保守结构域。(2)进化分析表明,CsNAC1和CsNAC2分别属于NAC家族的NAP和AtNAC3亚家族。(3)三维分子模型建模显示,CsNAC1和CsNAC2蛋白分别含有3个和2个α-螺旋,6个和7个β-折叠。(4)荧光定量PCR结果显示,CsNAC1在2个茶树品种中具有较相似的组织特异性,均在茶树成熟叶中表达量最高;CsNAC2则分别在‘安吉白茶’的幼叶中,‘迎霜’的根中表达量最高;高温(38℃)和低温(4℃)处理下,CsNAC1和CsNAC2基因的表达均受不同温度胁迫影响,不同茶树品种、不同时间段的表达存在差异。 展开更多
关键词 茶树 NAC 转录因子 进化分析 温度胁迫
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茶树AP2/ERF-B3类转录因子基因的克隆与表达特性分析 认领 被引量:13
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作者 吴致君 卢莉 +4 位作者 黎星辉 房婉萍 周琳 谭国飞 庄静 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期67-75,共9页
植物在受到高温、低温、干旱和盐害等逆境胁迫时,ERF作为信号转导因子被诱导并调控其他抗逆基因的表达。研究茶树AP2/ERF-B3类转录因子在不同茶树品种间的分子特性、组织表达和逆境响应情况,将有助于了解AP2/ERF转录因子在茶树逆境调控... 植物在受到高温、低温、干旱和盐害等逆境胁迫时,ERF作为信号转导因子被诱导并调控其他抗逆基因的表达。研究茶树AP2/ERF-B3类转录因子在不同茶树品种间的分子特性、组织表达和逆境响应情况,将有助于了解AP2/ERF转录因子在茶树逆境调控中的作用。以2个茶树品种‘安吉白茶’和‘迎霜’为试验材料,通过RT-PCR方法分别从2种茶树的cDNA中克隆得到CsERF-B3基因。利用实时定量PCR技术检测该基因在茶树根、茎、叶、花各组织和4种非生物逆境胁迫处理(4℃低温、38℃高温、200 g·L-1PEG干旱处理、200 mmol·L-1NaCl)中的表达情况。结果表明:2种茶树中CsERF-B3基因全长均为639 bp,编码212个氨基酸,含有保守的AP2结合域,是植物典型的AP2/ERF家族转录因子;该转录因子属于AP2/ERF转录因子家族中的ERF亚族B3组;该转录因子是亲水性蛋白,无序化特征明显,并与拟南芥AtERF1具有相似的三级结构;该基因在茶树根中表达量最高,并且均能快速响应高温(38℃)、低温(4℃)和高盐(200 mmol·L-1NaCl)等非生物逆境胁迫。结论:环境中常见非生物胁迫可诱导茶树中CsERF-B3基因的表达,表明该AP2/ERF-B3类转录因子在茶树非生物胁迫中起着重要调节作用。 展开更多
关键词 茶树 转录因子 AP2/ERF 进化分析 三级结构 表达分析
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茶树CsRAV2转录因子基因的克隆与表达特性分析 认领 被引量:5
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作者 吴致君 黎星辉 +3 位作者 房婉萍 周琳 赵真 庄静 《茶叶科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期297-306,共10页
RAV转录因子是AP2/ERF家族的成员之一,在植物生长发育和逆境调控中起着重要作用。本研究以安吉白茶和迎霜这两个茶树(Camellia sinensis)品种为试验材料,通过PCR和RT-PCR方法分别从两种茶树的DNA和cDNA中克隆得到CsRAV2基因。分析显示... RAV转录因子是AP2/ERF家族的成员之一,在植物生长发育和逆境调控中起着重要作用。本研究以安吉白茶和迎霜这两个茶树(Camellia sinensis)品种为试验材料,通过PCR和RT-PCR方法分别从两种茶树的DNA和cDNA中克隆得到CsRAV2基因。分析显示,来源于两种茶树中的CsRAV2基因全长均为1 089 bp,没有内含子,分别编码362个氨基酸,含有相对保守的AP2结合域和B3结构域,具有典型的植物RAV类转录因子特征。从氨基酸组成成分、理化性质、亲水性/疏水性、三级结构上分析显示,茶树中CsRAV2转录因子是亲水性蛋白。茶树中CsRAV2转录因子与拟南芥AtRAV具有相似的三级结构。实时定量PCR分析表明,茶树中CsRAV2基因在茶树根中表达量最高,高温、低温、NaCl处理均能诱导该基因表达,不同品种间存在差异。 展开更多
关键词 茶树 转录因子 RAV类 进化分析 三级结构 表达分析
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茶树CsDREB-A1转录因子基因的克隆及其特性分析 认领 被引量:5
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作者 刘志薇 吴致君 +2 位作者 黎星辉 李彤 庄静 《植物资源与环境学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期8-16,共9页
基于茶树品种‘迎霜’(Camellia sinensis‘Yingshuang’)的转录组数据,采用PCR方法从其基因组DNA中克隆获得编码DREB转录因子的CsDREB-A1基因。结果显示:该基因的开放阅读框(ORF)长度为585 bp,编码194个氨基酸,该氨基酸序列即为Cs... 基于茶树品种‘迎霜’(Camellia sinensis‘Yingshuang’)的转录组数据,采用PCR方法从其基因组DNA中克隆获得编码DREB转录因子的CsDREB-A1基因。结果显示:该基因的开放阅读框(ORF)长度为585 bp,编码194个氨基酸,该氨基酸序列即为CsDREB-A1转录因子。CsDREB-A1转录因子的N端含有AP2/ERF家族转录因子典型的AP2 DNA保守结合结构域,其中包含保守的YRG元件和WLG基序,且其第14位和第19位分别为缬氨酸和谷氨酸,该结构域的上、下游分别有PKK/RPAGRx KFx ETRHP和DSAW特征序列。通过进化分析可知CsDREB-A1转录因子属于AP2/ERF家族中DREB亚族的A1组,其与茶树CBF转录因子的相似性较高,与拟南芥〔Arabidopsis thaliana(Linn.)Heynh.〕等植物的DREB类转录因子也有较高的相似性。CsDREB-A1转录因子为亲水性蛋白,理论相对分子质量为21 165.4,理论等电点为p I 9.56,碱性、酸性、芳香族和脂肪族氨基酸比例分别为18%、10%、6%和18%;该转录因子只有1个包含53个氨基酸的无序化区域,且大部分无序化氨基酸位于AP2DNA保守结合结构域内,无序化氨基酸的比例为27.32%;在CsDREB-A1转录因子的三级结构中,N端有1个α螺旋、C端有3个β折叠。研究结果显示:CsDREB-A1转录因子可能与茶树的抗寒性相关。 展开更多
关键词 茶树 CsDREB-A1基因 转录因子 抗寒性
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茶树CsBAP1基因的克隆与非生物胁迫和激素响应分析 认领 被引量:1
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作者 王瑜 王文丽 +3 位作者 李辉 刘昊 滕瑞敏 庄静 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期1578-1586,共9页
该研究基于茶树转录组数据,从茶树‘龙井43'cDNA中克隆获得茶树CsBAP1基因,对其蛋白质序列特征和基因表达模式以及CsBAP1在茶树不同组织、不同激素处理及不同逆境胁迫下的表达水平进行荧光定量检测。结果显示:(1)克隆得到的茶树CsB... 该研究基于茶树转录组数据,从茶树‘龙井43'cDNA中克隆获得茶树CsBAP1基因,对其蛋白质序列特征和基因表达模式以及CsBAP1在茶树不同组织、不同激素处理及不同逆境胁迫下的表达水平进行荧光定量检测。结果显示:(1)克隆得到的茶树CsBAP1基因开放阅读框长度为543bp,编码180个氨基酸;CsBAP1蛋白为亲水性蛋白,理论相对分子质量为19 398Da,理论等电点为9.30,含有保守的Ca2+依赖性的C2结构域;茶树CsBAP1蛋白二级结构由8.89%的α-螺旋、7.78%的β-转角、35.56%的β-折叠和47.78%的随机卷曲组成;三级结构分析结果显示,CsBAP1包括螺旋和折叠结构,与二级结构吻合。(2)荧光定量分析结果显示,CsBAP1基因在茶树的花、花蕾、幼叶、老叶和成熟叶中均有表达,且在老叶中的表达量最高;外源施用ABA、IAA、MeJA、GA3以及SA均能够抑制茶树CsBAP1基因的表达;在高温(38℃)、低温(4℃)、干旱(200g·L(-1) PEG)、高盐(200mmol·L(-1) NaCl)胁迫下,CsBAP1的表达量均有所上调,且不同时间段的表达存在显著差异。该研究为进一步研究茶树CsBAP1基因的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 茶树 CsBAP1 多序列比对 激素 逆境胁迫 表达分析
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茶树HD-Zip转录因子基因的克隆及其对非生物胁迫的响应分析 认领 被引量:3
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作者 滕瑞敏 李辉 +4 位作者 王文丽 沈威 汪迎 崔新 庄静 《植物生理学报》 CSCD 北大核心 2017年第9期1803-1812,共10页
茶树作为一种叶用植物,具有重要的经济价值。非生物胁迫对茶树的生长发育过程和茶叶的生产影响很大。本研究采用RT-PCR方法从茶树‘龙井43’cDNA中克隆获得1个编码HD-Zip转录因子的基因CsHB1。序列分析显示,CsHB1基因cDNA长为1 380 bp,... 茶树作为一种叶用植物,具有重要的经济价值。非生物胁迫对茶树的生长发育过程和茶叶的生产影响很大。本研究采用RT-PCR方法从茶树‘龙井43’cDNA中克隆获得1个编码HD-Zip转录因子的基因CsHB1。序列分析显示,CsHB1基因cDNA长为1 380 bp,编码459个氨基酸,含有典型的START结构域。进化分析显示,茶树CsHB1属于HD-Zip家族转录因子的IV亚族。多序列对比发现,CsHB1与其他物种的HD-Zip类蛋白的氨基酸序列具有78.05%的相似性,如葡萄、烟草、芝麻等。对CsHB1转录因子理化性质、亲/疏水性、无序化分析显示,CsHB1转录因子是疏水性蛋白且显偏碱性,不存在无序化区域。空间结构分析显示,CsHB1有3个α-螺旋,多个β-折叠,且有START结构域。利用荧光定量PCR方法分析了CsHB1在高温(38°C)、低温(4°C)、PEG干旱(200 g·L-1)、NaCl(200 mmol·L-1)处理1、4、8、12 h的表达情况。结果表明,CsHB1基因在不同非生物胁迫处理下均能诱导表达,且表达差异性明显。 展开更多
关键词 茶树 HD-Zip转录因子 基因克隆 非生物胁迫 表达分析
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